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怎樣才能使ELISA試劑盒反響值添加
點擊次數:74      發布時間:2021-12-03

ELISA試劑盒實驗在必定溫度下的反響時刻并不是反響的結尾,溫育時刻過短、溫度過低,易致顯色不全;溫育時刻過長、溫度過高,易致非特異性緊附于反響孔周圍,難以清潔徹底,發生陰性高值或假陽性反響。


要嚴厲按規則的溫度和溫育時刻進行。如果參加的酶物過多或加在較高的孔壁上或孔口,也會致使本底添加或假陽性。


水浴箱門,嚴厲控制水浴的溫度為37±0.5。同時,微孔板不可堆疊放置,以確保傳熱均勻,各板的溫度都能敏捷到達平衡。


ELISA試劑盒實驗


當標本收集保留不妥發生溶血時,紅細胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過氧化物酶的性質,其通過吸附或“PP效應"(蛋白質間相互吸附的景象)后,可催化A、B液顯色而形成假陽性。


因為試劑盒一般設定的反響溫度為37度,在這個溫度下溫育必定時刻,蒸騰的水分會許多,關于全部反響系統來講,各種反響物的濃度會不斷地添加,這么必會致使反響zui終的值添加。


如果ELISA試劑盒樣品稀釋液少加或血清多加,都會致使本底增高。關于間接法來說,受上述兩個因素影響更大。


因為血清中受檢的特異性IgG只,IgG中的一小有些。IgG的吸附性很強,非特異性IgG可直接吸附到固相載體上,有時也可吸附到包被抗原的外表。


ELISA試劑盒實驗時,這些非特異性的IgG均能夠和酶標二抗發作反響而形成較高陰性本底或假陽性。假如參加的血清過多,高于規則的稀釋倍數,很容易形成高值陰性。反之,形成假陰性。

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